Hauptunterschied - HPLC vs HPTLC
Der Hauptunterschied zwischen HPLC und HPTLC besteht darin, dass HPLC eine quantitative Trennung von Komponenten in einer Probe ermöglicht, während HPTLC keine quantitative Trennung von Komponenten in einer Probe ermöglicht.
Die Chromatographie ist eine physikalische Trennmethode, mit der die Komponenten in einer Mischung getrennt und identifiziert werden. Sowohl HPLC als auch HPTLC sind chromatographische Techniken. HPLC ist Hochleistungsflüssigchromatographie. HPTLC ist eine Hochleistungs-Dünnschichtchromatographie.
INHALT
1. Überblick und Hauptunterschied
2. Was ist HPLC
? 3. Was ist HPTLC?
4. Vergleich nebeneinander - HPLC und HPTLC in tabellarischer Form
5. Zusammenfassung
Was ist HPLC?
HPLC ist Hochleistungsflüssigchromatographie. Es ist eine Analysetechnik, mit der Komponenten in einem Gemisch getrennt, identifiziert und quantifiziert werden. Bei dieser Technik wird die Probe in einem geeigneten Lösungsmittel gelöst. Dann wird das Lösungsmittel mit der Probe mit einem gegebenen Druck durch eine Pumpe geleitet. Die Pumpe ist mit festem Adsorbens gefüllt. Dann binden einige Komponenten stark an das absorbierende Material, während andere Komponenten lose binden. Dies führt dazu, dass die Komponenten unterschiedliche Durchflussraten durch die Pumpe haben. Daher können die Komponenten leicht getrennt werden.
Abbildung 01: Ein HPLC-System
Das Adsorbensmaterial, das die Pumpe füllt, wird als stationäre Phase bezeichnet. Das Lösungsmittel mit der gelösten Probe ist als mobile Phase bekannt. Die in dieser Technik verwendete Pumpe wird als Säule bezeichnet. Die Säule ist mit einem Adsorbensmaterial gefüllt, am häufigsten mit Siliciumdioxidpartikeln. Die Größe dieser Partikel kann im Bereich von 2 bis 50 & mgr; m liegen. Der Trennungsprozess wird durch die Zusammensetzung der mobilen Phase und die Temperatur des Systems beeinflusst. Die Wechselwirkungen zwischen der stationären Phase und der Komponente in der Probe können hydrophobe Wechselwirkungen, Dipol-Dipol-Wechselwirkungen, Ionenbindung usw. sein.
Der Betriebsdruck der HPLC ist erheblich höher als der der herkömmlichen Flüssigkeitschromatographie. Es liegt um 50-350 bar. Der Unterschied zwischen Flüssigkeitschromatographie und HPLC besteht darin, dass bei der Flüssigkeitschromatographie die Probe unter Schwerkraft durch die Säule fällt, während bei der HPLC die Probe durch die Säule unter Druck gesetzt wird. Die Größe der Säule und der absorbierenden Partikel ist im Vergleich zur herkömmlichen Flüssigkeitschromatographie ebenfalls sehr klein. Die durch die HPLC-Technik gegebene Auflösung ist jedoch überlegen.
Was ist HPTLC?
HPTLC ist eine Hochleistungs-Dünnschichtchromatographie. Es ist die fortschrittliche und automatisierte Form der traditionellen DC. Diese Technik bietet eine effiziente Auflösung in kurzer Zeit. Bei dieser Analysemethode können die Probe und eine Referenz gleichzeitig analysiert werden, wodurch die Probe mit der Referenz verglichen werden kann. Es bietet eine verbesserte analytische Genauigkeit als andere chromatographische Techniken. Der Zeitaufwand für die Analyse ist geringer. Die Technik ist eine kostengünstige Technik.
Abbildung 02: Eine Analyse von Lebensmittelfarbstoffen mittels HPTLC
Das HPTLC-Verfahren ist ein einfaches Verfahren, und der Probenvorbereitungsschritt entfällt ebenfalls (bei der herkömmlichen DC wird der Probenvorbereitungsschritt vor der Trennung eingeschlossen. Dieser Schritt umfasst die Reinigung und Anreicherung). Das Lösungsmittel kann direkt ohne Vorbehandlung verwendet werden, obwohl andere chromatographische Techniken Vorbehandlungen wie Entgasen, Filtrieren usw. erfordern.
Das in der HPTLC verwendete Adsorptionsmaterial ist Siliciumdioxid mit sehr kleinen Teilchengrößen. Bei der herkömmlichen DC beträgt die Partikelgröße von Siliciumdioxid 5 bis 20 & mgr; m, während sie bei der HPTLC 4 bis 8 & mgr; m beträgt. Die Probe wird mit einem Applikator auf die HPTLC-Platte aufgebracht. Es gibt eine einheitliche und sichere Anwendung. Dann werden die Platten in eine Kammer mit der mobilen Phase gebracht. Die Kammer sollte mit dem Dampf der mobilen Phase gesättigt sein. Nach dem HPTLC-Prozess können die bewegten Stellen erkannt werden. Bei der Erkennung der Flecken auf der Platte wird bei der HPTLC-Technik ein geeigneter UV-Bereich oder eine Jodkammer verwendet.
Was ist der Unterschied zwischen HPLC und HPTLC?
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HPLC vs HPTLC |
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HPLC ist Hochleistungsflüssigchromatographie. | HPTLC ist eine Hochleistungs-Dünnschichtchromatographie. |
Technik | |
Bei der HPLC wird die mobile Phase mit dem Lösungsmittel durch eine mit der stationären Phase gefüllte Säule geleitet. | Bei der HPTLC wird die Probe auf eine DC-Platte getupft und in eine Kammer gegeben, die die mobile Phase enthält; dann kann die Probe zusammen mit der mobilen Phase die Platte nach oben wandern. |
Messung | |
Bei der HPLC werden die Unterschiede zwischen den Flussraten der Komponenten durch die Säule verwendet, um die Komponenten in der Probe zu trennen. | Bei der HPTLC werden die Unterschiede zwischen den von jeder Komponente in der Probe zurückgelegten Entfernungen verwendet, um die Komponenten in der Probe zu trennen. |
Quantitative Trennung | |
HPLC ermöglicht die quantitative Trennung von Komponenten in einer Probe. | HPTLC erlaubt keine quantitative Trennung von Komponenten in einer Probe. |
Zusammenfassung - HPLC vs HPTLC
HPLC und HPTLC sind zwei chromatographische Techniken. Der Hauptunterschied zwischen HPLC und HPTLC besteht darin, dass HPLC eine quantitative Trennung von Komponenten in einer Probe ermöglicht, während HPTLC keine quantitative Trennung von Komponenten in einer Probe ermöglicht.