Hauptunterschied - Gelelektrophorese vs SDS Seite
Die Gelelektrophorese ist eine Technik, die Makromoleküle in einem elektrischen Feld trennt. In der Molekularbiologie ist es eine übliche Methode, DNA, RNA und Proteine nach ihrer Molekülgröße von Gemischen zu trennen. SDS Page ist eine Art der Gelelektrophorese, mit der Proteine anhand ihrer Größe von einer Proteinmischung getrennt werden. Gelelektrophorese ist ein Begriff, der verwendet wird, um die normale Technik zu bezeichnen, die für die DNA-, RNA- und Proteintrennung angewendet wird, während SDS Page eine Art von Gelelektrophorese ist. Dies ist der Hauptunterschied zwischen Gelelektrophorese und SDS-Seite.
INHALT
1. Überblick und Hauptunterschied
2. Was ist Gelelektrophorese
? 3. Was ist SDS? Seite
4. Nebeneinander Vergleich - Gelelektrophorese und Sicherheitsdatenblatt Seite
5. Zusammenfassung
Was ist Gelelektrophorese?
Die Gelelektrophorese ist eine übliche Technik, die in Laboratorien verwendet wird, um geladene Moleküle wie DNA, RNA, Proteine usw. von ihren Gemischen zu trennen. Bei der Gelelektrophorese wird ein Gel verwendet. Es wirkt als Molekularsieb. Bei der Gelelektrophorese werden zwei Arten von Gelen verwendet, nämlich Agarose und Polyacrylamid. Die Auswahl eines Gels und die Gelzubereitung sind wichtige Faktoren, die bei Gelelektrophoresen berücksichtigt werden müssen, da die Porengröße des Gels sorgfältig manipuliert werden sollte, um eine gute Trennung der Moleküle durch Gelelektrophorese zu erreichen. Die Gelelektrophorese hat ein elektrisches Feld, das mit zwei Enden des Gels verbunden ist. Ein Ende des Gels zeigt eine positive Ladung, während das andere Ende negativ geladen ist.
DNA und RNA sind negativ geladene Moleküle. Sobald sie vom negativen Ende des Gels in das Gel geladen und an das elektrische Feld angelegt wurden, wandern sie durch die Gelporen zum positiv geladenen Ende des Gels. Die Geschwindigkeit der Migration hängt von der Ladung und der Größe des Moleküls ab. Kleinere Moleküle wandern leicht durch die Gelporen als größere Moleküle. Daher bewegen sich kleinere Moleküle über eine lange Strecke durch das Gel und die größeren Moleküle über eine kurze Strecke. Um die Bewegung von Molekülen auf dem Gel zu beobachten, werden spezielle Farbstofftypen verwendet. Das elektrische Feld wird für einen bestimmten Zeitraum angelegt und gestoppt, um den Verlust von Molekülen zu verhindern und die Moleküle an ihren gefahrenen Positionen zu halten. Im Gel können unterschiedliche Banden beobachtet werden. Diese Banden repräsentieren die Moleküle unterschiedlicher Größe. Daher,Gelelektrophorese ist nützlich, um Moleküle nach ihrer Größe zu unterscheiden.
Die Gelelektrophorese wird als präparative Technik in der Molekularbiologie in verschiedene Techniken wie PCR, RFLP, Klonierung, DNA-Sequenzierung, Southern Blot, Genomkartierung usw. integriert.
Abbildung 01: Agarosegelelektrophorese
Was ist SDS-Seite?
Natriumdodecylsulfat-Polyacrylamid-Gelelektrophorese (SDS-Seite) ist eine Art der Gelelektrophorese, die zur Trennung von Proteinen verwendet wird. Wenn die Gelelektrophorese zur Trennung von Proteinen verwendet wird, sind spezielle Behandlungen erforderlich, da Proteine nicht wie DNA und RNA negativ geladen sind und nicht zum positiven oder negativen Ende wandern. Daher werden Proteine vor der Gelelektrophorese denaturiert und mit einer negativen Ladung beschichtet. Dies geschieht mit einem Waschmittel namens Natriumdodecylsulfat (SDS). Die Gelelektrophorese, bei der SDS und ein Polyacrylamidgel als Trägermedium verwendet werden, ist als SDS-Seite bekannt. Diese Technik wird häufig in der Biochemie, Genetik, Forensik und Molekularbiologie eingesetzt.
Während der SDS-Seite werden Proteine mit SDS gemischt. SDS entfaltet Proteine in eine lineare Form und beschichtet sie mit einer negativen Ladung proportional zu ihrer Molekülmasse. Aufgrund der negativen Ladung wandern Proteinmoleküle zum positiven Ladungsende des Gels und trennen sich entsprechend ihrer Molekularmasse. In SDS Page wird Polyacrylamid als fester Träger für das Gel verwendet. Die tatsächliche Trennung der Proteine hängt hauptsächlich von den Eigenschaften des Gels ab. Daher sollte die Herstellung des Polyacrylamidgels sorgfältig durchgeführt und die richtige Konzentration an Polyacrylamid verwendet werden. Polyacrylamidgele zeigen eine hohe Auflösung als Agarosegele. Daher wird SDS Page als hochauflösende Technik zur Proteintrennung angesehen.
SDS Page ist eine Art der Denaturierungsgelelektrophorese. Es hat eine große Einschränkung in der Proteinanalyse. Da SDS Proteine vor der Trennung denaturiert, ermöglicht es nicht den Nachweis von enzymatischer Aktivität, Proteinbindungswechselwirkungen, Protein-Cofaktoren usw.
Abbildung 02: SDB-Seite
Was ist der Unterschied zwischen Gelelektrophorese und SDS-Seite?
Gelelektrophorese vs SDS Seite |
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| Die Gelelektrophorese ist eine Methode zur Trennung von Makromolekülen unter Verwendung eines elektrischen Feldes. | SDS Page ist eine hochauflösende Gelelektrophoresetechnik, mit der Proteine anhand ihrer Masse getrennt werden. |
| Gel Run | |
| Es kann horizontal oder vertikal durchgeführt werden. | Die SDS-Seite wird immer vertikal ausgeführt. |
| Grundlage für die Trennung | |
| Die Trennung erfolgt nach Ladung und Größe. | Die Proteintrennung erfolgt nach Masse und Ladung. |
| Auflösung | |
| Die Agarosegelelektrophorese hat eine niedrige Auflösung und die Polyacrylamidgelelektrophorese hat eine höhere Auflösung | SDS Page hat eine bessere Auflösung. |
| Denaturierung | |
| Die Gelelektrophorese umfasst sowohl denaturierende als auch nicht denaturierende Techniken. | SDS Page denaturiert Proteine vor der Trennung. |
Zusammenfassung - Gelelektrophorese vs SDS Seite
Die Gelelektrophorese ist eine übliche Technik zur Trennung und Analyse von DNA, RNA und Proteinen anhand ihrer Größe und Ladung. Es gibt zwei Haupttypen der Gelelektrophorese, nämlich die Agarosegelelektrophorese und die Polyacrylamidgelelektrophorese. Agarosegele werden hauptsächlich zur Nukleinsäuretrennung verwendet; Wenn eine höhere Auflösung erforderlich ist, werden Polyacrylamidgele verwendet. SDS Page ist eine Art der Gelelektrophorese, die üblicherweise zur Trennung komplexer Proteinmischungen verwendet wird. Es wird als hochauflösende Proteintrennungstechnik angesehen. Dies ist der Unterschied zwischen Gelelektrophorese und SDS-Seite.
