Hauptunterschied - Horizontale und vertikale Gelelektrophorese
Die Gelelektrophorese ist eine in der Genetik verwendete Labortechnik, um Gemische, die DNA, RNA und andere Proteine enthalten, nach ihrer jeweiligen Ladung und Molekülgröße zu trennen. DNA, RNA oder Proteine, die bei dieser Methode getrennt werden müssen, werden durch ein Gel laufen gelassen, das kleine Poren enthält. Die Moleküle werden durch ein elektrisches Feld durch das Gel getrieben. Die Moleküle passieren die Poren des Gels und die Geschwindigkeit der Bewegung ist umgekehrt proportional zu ihren jeweiligen Längen. Daher bewegen sich Moleküle mit niedrigerer Molekülgröße schneller als Moleküle mit höherem Molekulargewicht. Das elektrische Feld wird durch die Ladungsdifferenz an zwei Enden des Gels erzeugt. Ein Ende enthält eine positive Ladung und das andere Ende enthält eine negative Ladung. Da DNA- und RNA-Moleküle negativ geladen sind,Sie werden zum positiv geladenen Ende des Gels hingezogen. Die Gelelektrophorese kann auf zwei verschiedene Arten erfolgen: horizontale Gelelektrophorese und vertikale Gelelektrophorese. Bei der horizontalen Gelelektrophorese liegt das Gel in horizontaler Ausrichtung vor und wird in einen kontinuierlich laufenden Puffer getaucht, der in der Gelbox selbst vorhanden ist. Bei der vertikalen Gelelektrophorese ist das Puffersystem vertikal ausgerichtet und diskontinuierlich, wobei oben und unten zwei Kammern mit einer Kathode bzw. einer Anode vorhanden sind. Dies ist der Hauptunterschied zwischen horizontaler und vertikaler Gelelektrophorese. Das Gel liegt in horizontaler Ausrichtung vor und wird in einen kontinuierlichen Laufpuffer getaucht, der sich in der Gelbox selbst befindet. Bei der vertikalen Gelelektrophorese ist das Puffersystem vertikal ausgerichtet und diskontinuierlich, wobei oben und unten zwei Kammern mit einer Kathode bzw. einer Anode vorhanden sind. Dies ist der Hauptunterschied zwischen horizontaler und vertikaler Gelelektrophorese. Das Gel liegt in horizontaler Ausrichtung vor und wird in einen kontinuierlichen Laufpuffer getaucht, der sich in der Gelbox selbst befindet. Bei der vertikalen Gelelektrophorese ist das Puffersystem vertikal ausgerichtet und diskontinuierlich, wobei oben und unten zwei Kammern mit einer Kathode bzw. einer Anode vorhanden sind. Dies ist der Hauptunterschied zwischen horizontaler und vertikaler Gelelektrophorese.
INHALT
1. Überblick und Hauptunterschied
2. Was ist horizontale Gelelektrophorese
? 3. Was ist vertikale Gelelektrophorese?
4. Ähnlichkeiten zwischen horizontaler und vertikaler Gelelektrophorese.
5. Nebeneinander-Vergleich - Horizontale und vertikale Gelelektrophorese in tabellarischer Form.
6. Zusammenfassung
Was ist horizontale Gelelektrophorese?
Die horizontale Gelelektrophorese nutzt die grundlegende Theorie zur Trennung von DNA-, RNA- oder Proteinmolekülen nach ihrer jeweiligen Molekülgröße und Ladung. Bei dieser Technik liegt das Gel in horizontaler Ausrichtung vor und wird in einen Puffer getaucht, der kontinuierlich ist. Agarosegel wird verwendet, um die Gelbox in zwei Kompartimente zu trennen. Ein Ende der Gelbox enthält eine Anode, während das andere Ende eine Kathode enthält. Wenn ein Strom angelegt wird, ermöglicht der in dieser Technik verwendete Puffer die Erzeugung eines Ladungsgradienten. Wenn die Ladung angewendet wird, neigt das Gel dazu, sich zu erwärmen. Der Puffer fungiert auch als Kühlmittel, das die Temperatur auf einem optimalen Niveau hält. Die Rückführung des Laufpuffers verhindert die Bildung eines pH-Gradienten. Ein diskontinuierliches Puffersystem kann bei der horizontalen Gelelektrophorese nicht verwendet werden, da die beiden Kompartimente des Gelsystems mit dem laufenden Puffer verbunden werden. Acrylamid wird während der Gelelektrophorese verwendet, um Proteinmischungen abzutrennen.
Abbildung 01: Horizontale Gelelektrophorese
Bei der horizontalen Gelelektrophorese kann Acrylamid nicht verwendet werden, da die Gelbox Sauerstoff ausgesetzt ist. Aufgrund der Anwesenheit von Sauerstoff wird die Polymerisation von Acrylamid gehemmt, was die Bildung des Gels stört. Die horizontale Gelelektrophorese ist eine mühelose Methode, die bei der Trennung von DNA und RNA eingesetzt wird.
Was ist vertikale Gelelektrophorese?
Die vertikale Gelelektrophorese-Technik funktioniert gemäß der primären Theorie der Gelelektrophorese, wird jedoch als komplexer angesehen als die horizontale Gelelektrophorese-Methode. Diese Technik verwendet einen diskontinuierlichen Puffer. Eine Kathode befindet sich in der oberen Kammer und die Anode befindet sich in der unteren Kammer. Die in jedem Fach vorhandenen Elektroden liefern das erforderliche elektrische Feld. Eine dünne Gelschicht wird zwischen die beiden montierten Glasplatten gegossen. Daher ist der obere Teil des Gels in die obere Kammer eingetaucht, und der untere Teil des Gels ist in die Kammer am Boden eingetaucht. Sobald der Strom angelegt ist, bewegt sich ein kleiner Teil des Puffers von der oberen Kammer durch das Gel in die untere Kammer. Der bei dieser Technik angelegte Strom besteht aus winzigen Einheiten.
Abbildung 02: Vertikale Gelelektrophorese
Bei der vertikalen Gelelektrophorese fließt Puffer nur durch das Gel. Dies ermöglicht eine genaue Steuerung des Spannungsgradienten während der Trennstufe. Acrylamidgel kann verwendet werden, da die Kompartimente keinem Luftsauerstoff ausgesetzt sind. Aufgrund der kleineren Porengröße des Acrylamidgels kann eine präzise Trennung mit einer höheren Auflösung erreicht werden.
Was sind die Ähnlichkeiten zwischen horizontaler und vertikaler Gelelektrophorese?
- Beide Systeme funktionieren nach der Grundtheorie der Gelelektrophorese.
- Anode und Kathode werden verwendet, um das erforderliche elektrische Feld in beiden Systemen bereitzustellen.
Was ist der Unterschied zwischen horizontaler und vertikaler Gelelektrophorese?
Diff Artikel Mitte vor Tabelle
Horizontale vs vertikale Gelelektrophorese |
|
| Die horizontale Gelelektrophorese ist eine Gelelektrophoresetechnik, bei der das Gel in horizontaler Ausrichtung vorliegt. | Die vertikale Gelelektrophorese ist eine Gelelektrophoresetechnik, bei der das Gel vertikal ausgerichtet ist. |
| Puffer | |
| Die horizontale Gelelektrophorese besteht aus einem kontinuierlichen Puffer. | Der Laufpuffer ist bei der vertikalen Gelelektrophorese diskontinuierlich. |
| Verwendung von Acrylamid | |
| Acrylamid kann nicht für die horizontale Gelelektrophorese verwendet werden, da die Gelbox Luftsauerstoff ausgesetzt ist. | Da das Gel aufgrund von zwei getrennten Kammern keinem Luftsauerstoff ausgesetzt ist, könnte Acrylamid für die vertikale Gelelektrophorese verwendet werden. |
| Funktion | |
| Die horizontale Gelelektrophorese wird häufiger zur Trennung von DNA- und RNA-Gemischen verwendet, nicht jedoch von Proteinen. | Die vertikale Gelelektrophorese wird verwendet, um Proteinmischungen zu trennen. |
Zusammenfassung - Horizontale und vertikale Gelelektrophorese
Die Gelelektrophorese ist eine Labortechnik, die bei der Trennung von Gemischen, die Moleküle aus DNA, RNA und Proteinen enthalten, weit verbreitet ist. Es gibt zwei Methoden der Gelelektrophorese: horizontale und vertikale Gelelektrophorese. Bei der horizontalen Gelelektrophorese ist der Laufpuffer kontinuierlich, während er bei der vertikalen Gelelektrophorese diskontinuierlich ist. Dies ist der Unterschied zwischen horizontaler und vertikaler Gelelektrophorese. Beide Systeme arbeiten nach dem gemeinsamen Prinzip der Gelelektrophorese.
Download PDF-Version von Horizontal vs Vertical Gel Electrophoresis
Sie können die PDF-Version dieses Artikels herunterladen und gemäß Zitierhinweis für Offline-Zwecke verwenden. Bitte laden Sie hier die PDF-Version herunter. Unterschied zwischen horizontaler und vertikaler Gelelektrophorese.
