Hauptunterschied - In-situ-Hybridisierung vs. Immunhistochemie
Die Diagnostik von Krebs und Infektionskrankheiten ist ein beliebter Trend, bei dem neuartige Techniken auf der Basis von Proteomik und Genomik eingesetzt werden, um Tumore oder infektiöse Zellen, ihre Proliferation und die Orte der Zellentwicklung zu identifizieren und die genetischen Grundlagen der meisten übertragbaren und nicht übertragbaren Krankheiten zu analysieren. Dies wird zu einer genauen Arzneimittelverarbeitung und -gestaltung sowie zur Entwicklung maßgeschneiderter Therapien für Krankheiten führen. In-situ-Hybridisierung (ISH) und Immunhistochemie (IHC) sind zwei derart weit verbreitete Techniken in der Krebsbiologie, und der Hauptunterschied zwischen In-situ-Hybridisierung und Immunchemie liegt in den Molekülen, die im Analyseverfahren verwendet werden. Bei der ISH werden die Nukleinsäuresonden in der Analyse verwendet, während bei der IHC monoklonale und polyklonale Antikörper für die diagnostischen Bestimmungen verwendet werden.
INHALT
1. Überblick und Hauptunterschied
2. Was ist In-Situ-Hybridisierung
? 3. Was ist Immunhistochemie?
4. Ähnlichkeiten zwischen In-Situ-Hybridisierung und Immunhistochemie.
5. Nebeneinander-Vergleich - In-Situ-Hybridisierung und Immunhistochemie in tabellarischer Form.
6. Zusammenfassung
Was ist In-situ-Hybridisierung (ISH)?
In-situ-Hybridisierung ist eine Nukleinsäurehybridisierungstechnik, die direkt an einem Teil oder Abschnitt des Gewebes, im gesamten Gewebe oder in Zellen durchgeführt wird. Die Technik hängt von der Theorie der komplementären Watson Crick-Basenpaarung ab, die entweder zu DNA-DNA-Hybriden oder zu DNA-RNA-Hybriden führt, die mutierte Gene nachweisen oder das erforderliche interessierende Gen identifizieren können. Einzelsträngige DNA-Sequenzen, doppelsträngige DNA-Sequenzen, einzelsträngige RNA-Sequenzen oder synthetische Oligonukleotidsequenzen werden als Sonden während der Hybridisierungstechnik verwendet, und diese Sonden werden an ihrem 5'-Ende mit einem radioaktiven Phosphor zur Identifizierung bei Autoradiographie markiert oder unter Verwendung von Fluoreszenzfarbstoffen markiert. Abhängig von der Art der verwendeten Sonde und der Art der angewandten Visualisierungstechnik stehen verschiedene Arten von ISH-Techniken zur Verfügung.
Abbildung 01: Fluoreszierende In-Situ-Hybridisierung
Es gibt viele Anwendungen von ISH, hauptsächlich in der molekularen Diagnostik von Infektionskrankheiten, um das Vorhandensein von Krankheitserregern zu identifizieren und den Krankheitserreger über die molekulare Diagnostik zu bestätigen. Es wird auch in den Bereichen Entwicklungsbiologie, Karyotypisierung und phylogenetische Analyse sowie physikalische Kartierung von Chromosomen eingesetzt.
Was ist Immunhistochemie (IHC)?
Bei der IHC-Technik ist das analysierte Hauptmolekül das Antigen. Während der IHC werden monoklonale und polyklonale Antikörper verwendet, um das Vorhandensein von Antigenen bei Infektion oder den Status der malignen Zellproliferation zu bestimmen. Die Technik basiert auf der Antigen-Antikörper-Bindung, und für diese Technik werden Enzymmarkierungen verwendet; Eine solche Anwendung ist der ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay). Die Marker können auch fluoreszenzmarkierte Antikörper oder radioaktiv markierte Antikörper sein.
Abbildung 02: Immunhistochemie
IHC wird häufig zur Erkennung von Krebszellen eingesetzt. Die diagnostischen Verfahren zielen auf die auf den Tumorzellen vorhandenen Antigene ab, um den Tumor zu identifizieren und zu charakterisieren. Das gleiche Verfahren wird zur Diagnose von Infektionserregern angewendet. Monoklonale und polyklonale Antikörper werden auch verwendet, um verschiedene Genprodukte zu analysieren, indem die Antikörper-Antigen-Bindungsreaktion zwischen dem gewünschten Protein und dem verabreichten synthetischen Antikörper ermöglicht wird.
Was sind die Ähnlichkeiten zwischen In-Situ-Hybridisierung und Immunhistochemie?
- ISH und IHC sind hochspezifische Reaktionen.
- Beide Techniken sind sehr genau.
- Beide Techniken können in der Diagnostik von Krebs und Infektionskrankheiten eingesetzt werden.
- Diese Techniken werden in sterilen In-vitro-Umgebungen durchgeführt.
- Beides sind schnelle Techniken, die reproduzierbare Ergebnisse liefern.
- ISH und IHC verwenden Nachweismethoden wie Radiomarkierung und Fluoreszenztechniken.
Was ist der Unterschied zwischen In-Situ-Hybridisierung und Immunhistochemie?
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In-situ-Hybridisierung vs. Immunhistochemie |
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| ISH ist eine Nukleinsäurehybridisierungstechnik, die direkt an einem Teil oder Abschnitt des Gewebes oder am gesamten Gewebe durchgeführt wird. | IHC ist eine Technik, bei der monoklonale und polyklonale Antikörper verwendet werden, um das Vorhandensein von Antigenen zu bestimmen, bei denen es sich um spezielle Proteinmarker handelt, die auf den Zelloberflächen platziert sind. |
| Art der analysierten Biomoleküle | |
| ISH analysiert Nukleinsäuren. | IHC analysiert Protein-Antigene. |
| Grundlagen der biochemischen Reaktion | |
| Bei dieser Technik tritt eine komplementäre Basenpaarung zwischen DNA-DNA oder DNA-RNA auf. | Antigen-Antikörper-Wechselwirkungen sind an der Immunhistochemie beteiligt. |
| Enzymgebundene Nachweismethoden | |
| Enzymgebundene Nachweismethoden können bei ISH nicht verwendet werden. | Enzymgebundene Nachweismethoden können bei IHC verwendet werden. |
Zusammenfassung - In-situ-Hybridisierung vs. Immunhistochemie
Die molekulare Diagnostik ist eine schnelle und bestätigende Methode, mit der eine nicht übertragbare Krankheit wie Krebs oder eine übertragbare Krankheit wie HIV oder Tuberkulose anhand der auf den Zellen vorhandenen molekularen Marker identifiziert werden kann, die zur Manifestation der Krankheit führen. Molekulare Marker können in Form von exprimierten Proteinen oder auf genetischer Ebene vorliegen, auf deren Grundlage verschiedene neue Techniken eingeführt werden, um die Effizienz zu erhöhen, und sind weniger mühsam, obwohl mit diesen Techniken hohe Kosten verbunden sind. Somit hängt ISH von der DNA-DNA- oder DNA-RNA-Hybridbildung ab, und IHC hängt von den spezifischen Reaktionen zwischen Antikörper und Antigen ab. Dies ist der Unterschied zwischen In-situ-Hybridisierung.
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