Hauptunterschied - HPLC vs LCMS
Betrachten wir zunächst die Bedeutung von HPLC und LCMS, bevor wir den Unterschied zwischen HPLC und LCMS analysieren. Die Chromatographie ist eine Trenntechnik in der chemischen Analyse, bei der Probenbestandteile während des Durchgangs durch ein chromatographisches Medium getrennt werden. Es beinhaltet auch die Interaktion mit der Probe, der stationären Phase und der mobilen Phase. HPLC steht für High Performance Liquid Chromatography und wird als Flüssigchromatographie-Methode in der analytischen Chemie eingesetzt. Die Kombination aus Flüssigkeitschromatographie und Massenspektroskopie (LCMS) wurde für die quantitative Analyse ausgewählter Biomoleküle entwickelt und ist im Vergleich zur HPLC ein hochempfindliches, genaues und spezifisches Testverfahren. Dies ist der Hauptunterschied zwischen HPLC und LCMC. Dieser Artikel führt Sie in HPLC und LCMC ein, die sich mit chemischer Analyse befassen und die Unterschiede zwischen HPLC und LCMS diskutieren.
Was ist HPLC?
Die Hochleistungsflüssigchromatographie (HPLC) ist eine beliebte Trenntechnik in der analytischen Chemie. Es wird hauptsächlich verwendet, um die Komponenten zu trennen, jede Komponente in einer Mischung zu identifizieren und zu quantifizieren. Früher war dieses Verfahren als Hochdruckflüssigchromatographie bekannt, da es von Pumpen abhing, ein unter Druck stehendes flüssiges Lösungsmittel, das die Probenmischung umfasste, durch eine mit einem festen Adsorbensmaterial gepackte Säule zu fließen. Jeder einzelne Bestandteil in der Probenmischung interagiert unterschiedlich mit dem festen Adsorbensmaterial, was zu unterschiedlichen Flussraten für unterschiedliche Bestandteile führt. Dies kann zur Trennung der Bestandteile führen, wenn diese aus der HPLC-Säule herausfließen.
HPLC wurde für verschiedene Anwendungen eingesetzt, z. B. zur Analyse des Vitamin-D-Spiegels im Blut, zum illegalen Drogenkonsum von Sportlern durch Nachweis der Arzneimittelrückstände im Urin, zum Aussortieren der Bestandteile einer komplexen biologischen Probe für Forschungszwecke sowie zur Analyse und Herstellung von Arzneimitteln.
Was ist LCMS?
Flüssigchromatographie-Massenspektrometrie (LCMS) ist eine Analysetechnik, die die physikalischen Trennfähigkeiten der Flüssigkeitschromatographie mit den Massenanalysefähigkeiten der Massenspektrometrie (MS) kombiniert. Die Flüssigkeitschromatographie ist eine Trenntechnik, und die Massenspektrometrie wird verwendet, um das Masse-Ladungs-Verhältnis geladener Teilchen zu analysieren. Die physikalische Trennung wird üblicherweise durch HPLC und alternativ durch LCMS, auch als HPLC-MS bekannt, erreicht. LCMS ist eine dominante Analysetechnik, die im Vergleich zur HPLC eine sehr hohe Genauigkeit, Empfindlichkeit und Spezifität aufweist. Daher ist es in vielen Anwendungen wie Forschungszwecken, Arzneimittelanalyse, Lebensmittelanalyse usw. nützlich. LCMS wird hauptsächlich verwendet, um biochemische Eigenschaften einer bestimmten Probe in Gegenwart komplexer chemischer Gemische zu trennen, nachzuweisen, zu identifizieren und zu quantifizieren.
Was ist der Unterschied zwischen HPLC und LCMC?
Akronym und Definition von HPLC und LCMC
HPLC: HPLC steht für High-Performance Liquid Chromatography. Es ist eine Trenntechnik, die hauptsächlich verwendet wird, um die Komponenten zu trennen, jede Komponente in einer Mischung zu identifizieren und zu quantifizieren.
LCMS: LCMS steht für Liquid Chromatography and Mass Spectrometry. Es ist eine Analysetechnik, die die physikalischen Trennungsfähigkeiten der Flüssigkeitschromatographie mit den Massenanalysefähigkeiten der Massenspektrometrie (MS) kombiniert.
Eigenschaften von HPLC und LCMC
Einstufung
HPLC: Dies ist nur eine Flüssigchromatographie-Methode.
LCMS: Dies ist eine Kombination aus Flüssigchromatographie-Methode und Massenspektrometrie-Methode.
Effizienz
HPLC: Im Vergleich zu LCMS ist die HPLC-Analyse weniger effizient und langsamer.
LCMS: Im Vergleich zur HPLC ist die LCMS-Analyse effizient und schneller.
Empfindlichkeit
HPLC: Im Vergleich zu LCMS ist die HPLC-Analyse weniger empfindlich.
LCMS: Im Vergleich zur HPLC ist die LCMS-Analyse empfindlicher.
Spezifität
HPLC: Im Vergleich zu LCMS ist die HPLC-Analyse weniger spezifisch.
LCMS: Im Vergleich zur HPLC ist die LCMS-Analyse spezifischer.
Richtigkeit
HPLC: HPLC liefert weniger genaue Ergebnisse als LCMS zur Bestimmung einiger Chemikalien.
LCMS: LCMS liefert genauere Ergebnisse als HPLC zur Bestimmung einiger Chemikalien.
Komponente
HPLC: HPLC kann als Bestandteil von LCMS betrachtet werden.
LCMS: LCMS kann nicht als Bestandteil der HPLC betrachtet werden.
Ionenquelle
HPLC: Im HPLC-Instrument ist keine Ionenquelle vorhanden.
LCMS: Die Ionenquelle ist im LCMS-Instrument vorhanden.
Anwendungen
HPLC: Ionen, Polymere, organische Moleküle und Biomoleküle können mittels HPLC analysiert werden.
LCMS: Organische Moleküle und Biomoleküle können analysiert werden. Im Gegensatz zur HPLC können mit LCMS unvollständig aufgelöste Gemische untersucht werden.
Betrieb
HPLC: Das Diagramm eines HPLC-Instruments ist in Abbildung 1 dargestellt und enthält normalerweise einen Autosampler, Pumpen und einen Detektor. Der Probenehmer führt die Probenmischung in die mobile Phase (unter Druck stehende Mischung von Lösungsmitteln wie Wasser, Acetonitril und / oder Methanol) ein, die sie auf die Säule überträgt. Die Pumpen liefern den gewünschten Fluss und die gewünschte Zusammensetzung der mobilen Phase durch die Säule. Die Säule ist mit dem Adsorbens gefüllt, bei dem es sich um ein körniges festes Teilchen wie Siliciumdioxid oder Polymere handelt. Der Detektor erzeugt ein Signal, das proportional zur Menge des Vorhandenseins von Probenbestandteilen in der Säule ist, wodurch eine quantifizierbare Analyse der ausgewählten Probenbestandteile ermöglicht wird. Das HPLC-Instrument wird gesteuert und die Datenanalyse wird von einem digitalen Mikroprozessor und einer Anwendersoftware bereitgestellt.
Abbildung 1: Diagramm des HPLC-Instruments
LCMS: Das Diagramm des LCMS-Instruments ist in Abbildung 2 dargestellt. Der Probenextrakt wird in die aus HPLC bestehende Säule eingefügt. Diese Säule enthält Probenmetaboliten basierend auf physikalischen Eigenschaften, und verschiedene Metaboliten fließen in verschiedenen Zeitintervallen zum Massenspektrometer. Massenspektroskopie dient zur Beurteilung von Partikelmassen, zur Bestimmung der Elementanordnung eines Moleküls und zur Klärung der Molekülstrukturen. Die Probe sollte jedoch ionisiert werden, um geladene Moleküle zu erzeugen, um deren Masse-Ladungs-Verhältnis zu bestimmen. Daher besteht LCMS anstelle von HPLC-Instrumenten aus drei zusätzlichen Modulen wie einer Eisenquelle, einem Massenanalysator und einem Detektor. Eine Ionenquelle kann eine Gasphasenprobe in Ionen umwandeln, und ein Massenanalysator gruppiert die Ionen anhand ihrer Massen unter Verwendung elektromagnetischer Felder. Schließlich,Ein Detektor quantifiziert die Werte und liefert Daten für jedes in der Probe vorhandene Ion. Die LCMS-Technik kann sowohl für qualitative als auch für quantitative Anwendungen verwendet werden.
Abbildung 2: Diagramm des LCMS-Instruments
Zusammenfassend ist HPLC eine Flüssigchromatographie-Methode, während LCMS eine Kombination aus Flüssigkeitschromatographie und Massenspektrometrie ist. Beide Analysetechniken weisen unterschiedliche Eigenschaften auf, können jedoch zur Identifizierung und Quantifizierung von Lebensmittelzusammensetzungen, Pharmazeutika und anderen bioaktiven Molekülen verwendet werden.
