Hauptunterschied - YAC vs BAC Vektoren
Vektoren werden beim molekularen Klonen verwendet. Ein Vektor kann als ein DNA-Molekül definiert werden, das sich als Vehikel verhält, um fremdes genetisches Material in eine andere Zelle zu transportieren. Ein Vektor, der fremde DNA enthält, ist als rekombinante DNA bekannt und sollte die Fähigkeit haben, sie innerhalb des Wirtsorganismus zu replizieren und zu exprimieren. Das künstliche Hefechromosom (YAC) und das bakterielle künstliche Chromosom (BAC) sind zwei Arten von Vektoren, die an der Klonierung beteiligt sind. Der Hauptunterschied zwischen YAC und BAC besteht darin, dass YAC ein künstlich konstruiertes Vektorsystem ist, das eine bestimmte Region des Hefechromosoms verwendet, um große Segmente genetischen Materials in Hefezellen einzufügen, während BAC ein künstlich konstruiertes Vektorsystem ist, das eine bestimmte Region des E. coli-Chromosoms verwendet große DNA-Segmente in E. coli-Zellen einzufügen.
INHALT
1. Überblick und Hauptunterschied
2. Was sind YAC-Vektoren
? 3. Was sind BAC-Vektoren.
4. Vergleich nebeneinander - YAC- und BAC-Vektoren.
5. Zusammenfassung
Was sind YAC-Vektoren?
YAC (künstliches Hefechromosom) ist ein künstlich gebautes Chromosom, das ein großes Segment fremder DNA tragen und sich in den Hefezellen replizieren kann. Es hat ein Zentromer, Telomere sowie autonom replizierende Sequenzen, die für die Replikation und Stabilität wesentlich sind. YAC sollte auch einen oder mehrere selektive Marker und Restriktionsstellen tragen, um es zu einem wirksamen Klonierungsvektor zu machen. Eine große Sequenz im Bereich von 1000 kb bis 2000 kb kann in YAC inseriert und in Hefe übertragen werden. Die Transformationseffizienz von YAC ist sehr gering.
Abbildung 01: YAC-Vektor
Was sind BAC-Vektoren?
Das bakterielle künstliche Chromosom (BAC) ist ein künstlich konstruiertes Chromosom für die molekulare Klonierung. Es hat spezifische Regionen des E. coli F-Plasmids und ist kreisförmig und super gewickelt. BAC wurde entwickelt, um DNA-Fragmente in Bakterien, insbesondere in E. coli, zu klonieren. Es kann DNA-Fragmente mit Größen bis zu 300 kb tragen. Im Vergleich zu YAC sind BAC-Kloneinsätze kleiner. BACs wurden 1992 entwickelt und sind aufgrund ihrer Stabilität und einfachen Konstruktion immer noch beliebt. BACs sind auch nützlich bei der Entwicklung von Impfstoffen.
Abbildung 02: BAC-Vektor beim molekularen Klonen
Was ist der Unterschied zwischen YAC- und BAC-Vektoren?
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YAC vs BAC Vektoren |
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| YAC ist ein gentechnisch verändertes Chromosom, bei dem Hefe-DNA zum Klonen verwendet wird. | BAC ist ein gentechnisch verändertes DNA-Molekül, das zum Klonen E. coli-DNA verwendet. |
| Geschlecht | |
| YACs wurden entwickelt, um große Fragmente genomischer DNA in Hefe zu klonieren. | BACs wurden entwickelt, um große genomische Fragmente in Escherichia coli zu klonieren. |
| Länge einfügen | |
| YACs können genomische Inserts in Megabasisgröße (1000 kb - 2000 kb) enthalten. | BACs können Einsätze von 200–300 kb oder weniger tragen. |
| Konstruktion | |
| YAC-DNA ist schwer intakt zu reinigen und erfordert eine hohe Konzentration zur Erzeugung des YAC-Vektorsystems. | BAC ist leicht intakt zu reinigen und kann leicht konstruiert werden. |
| Chimärismus | |
| YACs sind oft chimär. | BACs sind selten chimär. |
| Stabilität | |
| YAC ist instabil. | BAC ist stabil. |
| Änderungen | |
| Heferekombination ist sehr machbar und bleibt immer aktiv. Daher kann es in einem YAC zu Deletionen und anderen Umlagerungen kommen. | Die Rekombination von E. coli wird verhindert und bei Bedarf aktiviert. Daher werden die unerwünschten Umlagerungen in BACs reduziert. |
| Instandhaltung | |
| Das Manipulieren von rekombinanten YACs erfordert normalerweise, dass YAC zur anschließenden Manipulation in E. coli übertragen wird. Daher ist es ein mühsamer Prozess. | Die BAC-Modifikation erfolgt direkt in E. coli. Ein DNA-Transfer ist also nicht erforderlich. Daher ist der Prozess nicht mühsam. |
Zusammenfassung - YAC vs BAC Vektoren
YAC ist aufgrund seiner Fähigkeit, große DNA-Fragmente in den Wirtsorganismus zu klonen, zu einem wesentlichen Forschungsinstrument bei Klonierungsprozessen geworden. YACs haben jedoch mehrere Nachteile als Vektoren, wie Konstruktionsschwierigkeiten, Chimärismus, Instabilität usw. Um diese Probleme zu überwinden, haben Wissenschaftler BAC-Vektoren entwickelt. BAC wurde unter Verwendung spezifischer Regionen des E. coli-Chromosoms konstruiert. Es ist ein stabiler Vektor und kann leicht konstruiert werden. Die Länge der DNA, mit der BAC umgehen kann, ist jedoch bis zu 20-mal geringer als die von YAC. Dies ist der Unterschied zwischen YAC- und BAC-Vektorsystemen. Heutzutage wird BAC in den Labors gegenüber YAC bevorzugt.
