Hauptunterschied - Gram Stain vs Acid Fast
Bakterien sind sehr kleine Mikroorganismen. Sie sind transparent und ihre Erkennung ist unter lebenden und nicht gefärbten Bedingungen schwierig. Daher werden verschiedene Färbemethoden entwickelt, um den Nachweis von Bakterien zu erleichtern. Es gibt drei Haupttypen von Färbetechniken: einfache Färbung, Differenzialfärbung und Strukturfärbung. Die Differenzialfärbung ist eine Technik, bei der mehr als eine Färbung zur Differenzierung von Bakterien verwendet wird. Gramfärbung und säurefeste Färbung sind im Volksmund als Differenzialfärbungen bekannt. Die Gramfärbung ist eine Differenzialfärbungstechnik, bei der Bakterien in zwei Gruppen unterteilt werden, die als grampositive Bakterien und gramnegative Bakterien bekannt sind. Die säurefeste Färbung ist eine Differenzialfärbung, die verwendet wird, um säurefeste Organismen wie Mycobacterium von nicht säurefesten Organismen zu identifizieren. Dies ist der Hauptunterschied zwischen Gram-Färbung und Acid Fast-Färbung.
INHALT
1. Überblick und Hauptunterschied
2. Was ist Gram Stain
3. Was ist Acid Fast
4. Ähnlichkeiten zwischen Gram Stain und Acid Fast
5. Nebeneinander Vergleich - Gram Stain vs Acid Fast in tabellarischer Form
6. Zusammenfassung
Was ist Gram Stain?
Die Gramfärbung ist eine wichtige Differenzialfärbungstechnik zur Identifizierung von Bakterien in der Mikrobiologie. Diese Technik wurde 1884 vom dänischen Bakteriologen Hans Christian Gram eingeführt. Die Gramfärbung kategorisiert Bakterien in zwei Hauptgruppen, die als grampositiv und gramnegativ bezeichnet werden und für die Klassifizierung und Identifizierung von Bakterien sehr wichtig sind. Mikrobiologen führen während ihrer Studien eine Grammfärbung als ersten Schritt bei der Charakterisierung von Bakterien durch.
Bakterien werden basierend auf den Unterschieden in ihrer Zellwand gruppiert. Grampositive Bakterien bestehen aus einer dicken Peptidoglycanschicht in ihrer Zellwand, während gramnegative Bakterien aus einer dünnen Peptidoglycanschicht in ihrer Zellwand bestehen. Das Ergebnis der Grammfärbung basiert auf dem Unterschied in der Dicke der Peptidoglycanschicht der Zellwand.
Die Grammfärbung wird unter Verwendung von vier verschiedenen Reagenzien durchgeführt, nämlich; Primärfärbung, Beizmittel, Entfärbungsmittel und Gegenfärbung. Kristallviolett und Safranin werden als Primär- bzw. Gegenfärbung verwendet, während Gramm Jod und 95% Alkohol als Beizmittel bzw. Entfärbungsmittel verwendet werden. Die grundlegenden Schritte der Grammfärbung sind wie folgt;
- Ein Bakterienabstrich wird auf einem sauberen Glasobjektträger hergestellt, wärmefixiert und gekühlt.
- Der Abstrich wird 1 - 2 Minuten lang mit Kristallviolett geflutet.
- Der Abstrich wird mit langsam fließendem Leitungswasser gespült, um überschüssige Flecken zu entfernen.
- Gramm Jod wird 1 Minute lang auf den Abstrich aufgetragen.
- Der Abstrich wird mit langsam fließendem Leitungswasser gespült
- Der Abstrich wird 2 - 5 Sekunden lang mit 95% igem Alkohol gewaschen und mit langsam fließendem Leitungswasser gespült.
- Der Abstrich wird 1 Minute lang mit Safranin gegengefärbt
- Der Abstrich wird mit langsam fließendem Leitungswasser gespült, getrocknet und unter dem Mikroskop beobachtet.
Am Ende der Grammfärbung werden gramnegative Bakterien in rosa Farbe beobachtet, während grampositive Bakterien in lila Farbe beobachtet werden.
Abbildung 01: Gramnegative und grampositive Bakterien
Das Ergebnis der Grammfärbung wird durch die Dicke der Peptidoglycanschicht in ihrer Zellwand bestimmt. Während des Entfärbungsschritts werden Primärfärbung und Beizmittel leicht von den gramnegativen Bakterien entfernt und werden farblos, da sie eine dünne Peptidoglycanschicht aufweisen. Die Primärfärbung bleibt in den grampositiven Bakterien erhalten, da sie eine dicke Peptidoglycanschicht aufweisen. Die Gegenfärbung ist für grampositive Bakterien aufgrund der Beibehaltung der Primärfärbung nicht wirksam. Somit sind grampositive Bakterien in der Farbe der Primärfärbung sichtbar, dh in der Farbe Purpur. Die Gegenfärbung färbt die gramnegativen Bakterien und sie sind in der Farbe Pick sichtbar, die die Safraninfarbe ist. Daher ist es einfach, Bakterien durch Grammfärbung in zwei Gruppen einzuteilen, und es ist wertvoll für die Differenzierung und Identifizierung von Bakterien.
Was ist säurefest?
Säurebeständigkeit ist eine physikalische Eigenschaft bestimmter Bakterien, insbesondere ihre Beständigkeit gegen Entfärbung durch Säuren während Färbeverfahren. Einmal gefärbt, widerstehen diese Organismen verdünnten Entfärbungsverfahren auf Säure- und / oder Ethanolbasis, die in vielen Färbeprotokollen üblich sind. Daher wird diesen Organismen der Name "säurefest" gegeben. Diese Eigenschaft wird aufgrund eines hohen Gehalts an wachsartigem Material (Mykolsäuren) in ihren Zellwänden gezeigt. Dieser Test ist entscheidend für die Identifizierung von Mycobacterium tuberculosis.
Abbildung 2: Säurefeste Mykobakterien
Diese säurefeste Färbung wurde 1882 von Paul Ehrlich entwickelt. Ehrlichs säurefeste Technik wurde von Ziehl-Neelsen modifiziert und wird heute häufiger verwendet. Das säurefeste Färbeverfahren umfasst drei verschiedene Reagenzien. Carbol Fuschin wird als Primärfärbung verwendet. Als Entfärbungsmittel wird saurer Alkohol verwendet. Methylenblau wird als Gegenfärbung verwendet. Das Färbeverfahren wird wie folgt durchgeführt.
- Die Primärfärbung (Carbolfuchsin) wird auf die fixierte Probe auf dem Objektträger aufgetragen (alle Zellen werden rot gefärbt).
- Der Objektträger wird durch 5-minütiges Dämpfen erhitzt, wodurch die Flecken ordnungsgemäß in die Zellen getrieben werden.
- Dann wird die Entfärbungslösung zugegeben (dies entfernt den roten Farbstoff von allen Zellen mit Ausnahme der säurefesten Bakterien).
- Methylenblau wird als Gegenfärbung hinzugefügt (es färbt alle entfärbten Bakterienzellen).
- Säurefeste Bakterien bleiben rot, während säurefeste Bakterien blau färben.
Was sind die Ähnlichkeiten zwischen Gram Stain und Acid Fast?
- Gramfärbung und Säure schnell sind zwei unterschiedliche Färbetechniken.
- Beide Techniken kategorisieren Bakterien in zwei Gruppen.
- Beide Techniken verwenden zwei Flecken und eine Entfärbung.
Was ist der Unterschied zwischen Gram Stain und Acid Fast?
Diff Artikel Mitte vor Tabelle
Gramm Fleck gegen Säure schnell |
|
| Die Gramfärbung ist eine Differenzialfärbungstechnik, bei der Bakterien in zwei Gruppen unterteilt werden: grampositive Bakterien und gramnegative Bakterien. | Acid Fast Stain ist eine Differenzialfärbung, mit der säurefeste Organismen von nicht säurefesten Organismen identifiziert werden. |
| Primärfärbung | |
| Kristallviolett ist die häufig verwendete Primärfärbung bei der Grammfärbung. | Carbolfuchsin ist der primäre Farbstoff, der in säurefesten verwendet wird. |
| Entfärbungsmittel | |
| 95% iger Alkohol wird als Entfärbungsmittel bei Grammfärbungen verwendet. | Saurer Alkohol wird als Entfärbungsmittel in säurefester Form verwendet. |
| Gegenfleck | |
| Bei der Gramfärbung wird Safranin als Gegenfärbung verwendet. | Bei säurefester Färbung wird Methylenblau als Gegenfärbung verwendet. |
| Überwachung | |
| Gramnegative Bakterien werden in Pick-Farbe und grampositive Bakterien in lila Farbe beobachtet. | Säurefeste Bakterien werden in roter Farbe und nicht säurefeste Bakterien in blauer Farbe beobachtet. |
Zusammenfassung - Gram Stain vs Acid Fast
Die Visualisierung von Mikroorganismen im lebenden Zustand ist schwierig. Daher werden biologische Färbungen und Färbeverfahren ausgiebig verwendet, um ihre Eigenschaften zu untersuchen. Die Differenzialfärbung ist eine Art von Färbetechnik, die zur Differenzierung von Bakterien verwendet wird. Gramfärbung und säurefeste Färbung sind zwei unterschiedliche Färbetechniken. Die Gramfärbung unterscheidet gramnegative und grampositive Bakterien anhand der Dicke ihrer Zellwände. Die säurefeste Färbung unterscheidet säurefeste Bakterien von nicht säurefesten Bakterien anhand des Mykolsäuregehalts in der Zellwand. Dies ist der Unterschied zwischen säurefester und Grammfärbung.
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