Unterschied Zwischen RNASE A Und RNASE H

2024 Autor: Mildred Bawerman | [email protected]. Zuletzt bearbeitet: 2023-12-16 08:37

Hauptunterschied - RNASE A gegen RNASE H

Die Ribonukleasen sind Nukleasen, die RNA spezifisch in kleinere Einheiten abbauen. Sie können in zwei Kategorien unterteilt werden; Endoribonukleasen und Exoribonukleasen. Endoribonuklease ist eine Endonuklease, die entweder einzelsträngige oder doppelsträngige RNA abbauen kann. Es spaltet die Phosphodiesterbindungen innerhalb einer RNA-Polynukleotidkette. Die Beispiele sind RNase A, RNase III, RNase T1, RNase P und RNase H. Exoribonuklease ist eine Exonuklease, die RNA abbaut, indem terminale Nukleotide entweder vom 5'-Ende oder vom 3'-Ende des RNA-Moleküls entfernt werden. Die Beispiele sind RNase R, RNase II, RNase D und RNase PH. Der Hauptunterschied zwischen RNASE A und RNASE H besteht darin, dass die RNase A eine Pankreas-Ribonuklease ist, die einzelsträngige RNA spezifisch in kleinere Komponenten abbaut, während RNase H ein unspezifisches Enzym ist, das die RNA im RNA-DNA-Hybrid über in kleinere Einheiten spaltet der hydrolytische Mechanismus.

INHALT

1. Überblick und

Hauptunterschied 2. Was ist RNASE A

3. Was ist RNASE H

4. Ähnlichkeiten zwischen RNASE A und RNASE H

5. Vergleich nebeneinander - RNASE A gegen RNASE H in tabellarischer Form

6. Zusammenfassung

Was ist RNASE A?

Die RNase A ist eine Pankreas-Ribonuklease, die spezifisch die ungepaarten Cytosin- und Uracil-Reste am 3'-Ende der einzelsträngigen RNA spaltet. RNase H arbeitet bei einer höheren Salzkonzentration (0,3 M oder höhere NaCl-Konzentration). Die hydrolytische Reaktion erfolgt in zwei Schritten. Es bildet ein 3'-phosphoryliertes Produkt über ein 2 ', 3'-cyclisches Monophosphat-Zwischenprodukt. Obwohl es spezifisch für einzelsträngige RNA bei höherer Salzkonzentration ist, kann es auch doppelsträngige RNA und RNA in RNA-DNA-Hybrid bei niedrigerer NaCl-Konzentration (niedriger als 0,3 M NaCl) abbauen.

Bruce Merrifield synthetisierte zuerst dieses Enzym. RNase A ist ein sehr beliebtes Enzym in der molekularen Forschung. Rinderpankreas-RNase A ist ein Beispiel für RNase A. Und es ist eines der härtesten Enzyme, die im Labor verwendet werden. Dieses Enzym benötigt für seine Aktivität keinen Cofaktor. Es ist ein sehr thermostabiles Enzym. RNase A ist das erste Enzym und das dritte Protein, für das eine korrekte Aminosäuresequenz nachgewiesen wurde. Dieses Enzym ist mit 124 Aminosäuren und einer Molmasse von 12600 da sehr klein. Und es hat vier Histidinreste (His 12 und His 119, die an der katalytischen Reaktion beteiligt sind).

Abbildung 01: Die RNase A.

RNase A kann durch Kochen einer Rohprobe isoliert werden. Beim Kochen bauen alle anderen Enzyme die verbleibende RNase A ab. RNase A ist ein erstaunlich stabiles Enzym. Dieses Enzym hemmt mit Ribonuklease-Inhibitor-Protein-, Schwermetall- und Uridin-Vanadat-Komplexen.

Was ist RNase H?

Die RNase H ist ein unspezifisches Ribonukleaseenzym, das RNA in RNA-DNA-Hybrid über eine hydrolytische Reaktion abbauen kann. Die RNase H spaltet die 3'-OP-Bindung von RNA in einem RNA-DNA-Hybrid. Letztendlich produziert es 3'OH- und 5'-Phosphat-terminierte Produkte. Bei der DNA-Replikation spielt es eine entscheidende Rolle, indem es den RNA-Primer entfernt, nachdem neue DNA-Stränge gebildet wurden. Unter Laborbedingungen baut es spezifisch RNA in RNA-DNA-Hybrid ab, nicht jedoch DNA und nicht hybridisierte RNA. Und dieses Enzym wird normalerweise verwendet, um die RNA-Matrize zu zerstören, nachdem der erste komplementäre DNA-Strang während der cDNA-Synthese gebildet wurde.

Abbildung 02: RNase H.

RNase H wird auch in Nuklease-Schutz-Assays verwendet. Es kann auch zur Entfernung des Poly-A-Schwanzes aus der mRNA eingebaut werden. RNase H hat die Fähigkeit, die nichtkodierende RNA innerhalb und außerhalb der Zelle zu zerstören. Die Metallionen werden als Cofaktoren für diese Proteinaktivität benötigt. Ein Chelator (EDTA) kann verwendet werden, um das RNase H-Enzym zu hemmen.

Was sind die Ähnlichkeiten zwischen RNASE A und RNASE H?

• Beide sind von Natur aus Protein.
• Beide sind Endoribonuklease
• Beide können RNA abbauen.
• Beide führen hydrolytische Reaktionen durch.
• Molekulare Laboratorien verwenden beide.

Was ist der Unterschied zwischen RNASE A und RNASE H?

Diff Artikel Mitte vor Tabelle

RNASE A gegen RNASE H
RNase A ist eine Pankreas-Ribonuklease, die spezifisch das 3'-Ende von ungepaarten Cytosin- und Uracil-Resten einzelsträngiger RNA bei höherer Salzkonzentration spaltet.	RNase H ist ein unspezifisches Ribonukleaseenzym, das RNA in RNA-DNA-Hybrid über eine hydrolytische Reaktion abbauen kann.
Art der RNA-Spaltung
RNase A spaltet spezifisch einzelsträngige RNA bei höherer Salzkonzentration.	RNase H spaltet RNA in RNA-DNA-Hybrid.
Notwendigkeit von Co-Faktoren für die Aktivität
RNase A benötigt für seine Aktivität keine Cofaktoren.	RNase H benötigt Metallionen als Cofaktoren für seine Aktivität.
Inhibitoren der Proteinaktivität
Ribonuklease-Inhibitor-Protein-, Schwermetall- und Uridin-Vanadat-Komplexe hemmen die RNAse A-Aktivität.	Ein Chelator (EDTA) hemmt die RNase H-Aktivität.
Entfernung des RNA-Primers bei der DNA-Replikation
RNase A wird nicht zur Entfernung von RNA-Primern bei der DNA-Replikation verwendet.	RNase H wird zur Entfernung von RNA-Primern bei der DNA-Replikation verwendet
DNA-Template-Entfernung bei der komplementären DNA (C-DNA) -Synthese
RNase A wird nicht zur Entfernung von RNA-Matrizen während der Synthese von komplementärer DNA (C-DNA) verwendet.	RNase H wird zur Entfernung von RNA-Matrizen während der Synthese von komplementärer DNA (C-DNA) verwendet.
Entfernung von Poly-A-Tail in mit Oligo hybridisierter mRNA (dt)
RNase A wird nicht verwendet, um "Poly-A-Schwanz" in mit Oligo (dt) hybridisierter mRNA zu entfernen.	RNase H wird verwendet, um "Poly-A-Schwanz" in mit Oligo (dt) hybridisierter mRNA zu entfernen.

Zusammenfassung - RNASE A gegen RNASE H

Die Ribonukleasen sind Nukleaseenzyme, die die Fähigkeit haben, RNA in kleinere Einheiten zu spalten. Es gibt zwei Arten; Endoribonukleasen und Exoribonukleasen. Endoribonuklease ist eine Endonuklease, die die Fähigkeit besitzt, einzelsträngige oder doppelsträngige RNA abzubauen. Und es spaltet die Phosphodiesterbindung innerhalb einer RNA-Polynukleotidkette. RNase A und RNase H sind zwei Endoribonukleasen. RNase A ist eine Pankreas-Ribonuklease, die spezifisch ungepaarte Cytosin- und Uracilreste am 3'-Ende der einzelsträngigen RNA bei höherer Salzkonzentration spaltet. RNase H ist ein unspezifisches Ribonukleaseenzym, das RNA in RNA-DNA-Hybrid über eine hydrolytische Reaktion abbauen kann. Dies ist der Unterschied zwischen RNase A und RNase H.

Laden Sie das PDF RNASE A vs RNASE H herunter

Sie können die PDF-Version dieses Artikels herunterladen und gemäß Zitierhinweis für Offline-Zwecke verwenden. Bitte laden Sie hier die PDF-Version herunter. Unterschied zwischen RNASE A und RNASE H.