Hauptunterschied - Nitrocellulose vs Nylonmembran
Blotting ist eine wichtige Technik zum Nachweis spezifischer Sequenzen von DNA, RNA und Proteinen aus ihren Gemischen in der Molekularbiologie. Dies geschieht mit einer Membran namens Blot. Es gibt verschiedene Blotting-Techniken wie Northern-, Southern- und Western-Blotting. Die Auswahl einer geeigneten Membran für den Blotting-Prozess sollte sorgfältig erfolgen, um unspezifische Bindungen und falsche Nachweise zu vermeiden. Nitrocellulose, Nylon und PVDF sind häufig verwendete Membranen in Blotting-Techniken. Sie haben unterschiedliche Eigenschaften. Der Hauptunterschied zwischen Nitrocellulose und Nylonmembran besteht darin, dass Nitrocellulosemembranen ein hohes Proteinimmobilisierungspotential aufweisen, während Nylonmembranen ein hohes Nukleinsäureaobilisierungspotential aufweisen. Beide Arten von Membranen werden jedoch häufig in Blotting-Techniken verwendet.
INHALT
1. Überblick und Hauptunterschied
2. Was ist eine Nitrocellulosemembran
? 3. Was ist eine
Nylonmembran? 4. Vergleich nebeneinander - Nitrocellulose mit Nylonmembran
5. Zusammenfassung
Was ist eine Nitrocellulosemembran?
Die Nitrocellulosemembran ist ein häufig verwendeter Membranfilter in Nukleinsäure- und Protein-Blotting-Techniken. Es hat ein hohes Proteinbindungspotential. Daher werden Nitrocellulosemembranen in der Western-Blot-Technik häufig verwendet. Nitrocellulosemembranen sind mit allen Hybridisierungstechniken kompatibel und zeigen überlegene Bindungskapazitäten ohne Interferenzen. Nitrocellulosemembranen sind von Natur aus hydrophil. Sie interagieren hydrophil mit Molekülen und immobilisieren sie effizient auf der Membran. Kommerzielle Nitrocellulosemembranen sind in zwei Porengrößen erhältlich: 0,45 und 0,2 um.
Abbildung 01: Nitrocellulosemembran für das Western Blot
Was ist eine Nylonmembran?
Die Nylonmembran ist eine andere Art von kommerzieller Membran, die in Blotting-Techniken verwendet wird. Es wird alternativ mit Nitrocellulosemembranen für das Southern- und Northern-Blotting verwendet. Nylonmembranen sind aufgrund ihrer hohen Affinität zur Bindung an DNA ideal für das Southern-Blotting als Nitrocellulose. Aufgrund mehrerer einzigartiger Merkmale von Nylonmembranen verwenden Forscher üblicherweise Nylonmembranen für das Southern- und Northern-Blotting anstelle einer Über-Nitrocellulosemembran. Im Gegensatz zu Nitrocellulose werden Nylonmembranen auch zum Abziehen und erneuten Probieren empfohlen.
Abbildung 02: Nylonmembran für Southern Blot
Was ist der Unterschied zwischen Nitrocellulose und Nylonmembran?
Diff Artikel Mitte vor Tabelle
Nitrocellulose gegen Nylonmembran |
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| Nitrocellulosemembranen sind spröde. | Nylonmembranen sind weniger spröde. |
| Handhabung | |
| Sie sind schwer zu handhaben. | Sie sind einfach zu handhaben. |
| Reprobing | |
| Nicht unterstützte Nitrocellulosemembranen sind schwer zu tadeln. | Das Nachprobieren ist mit Nylonmembranen einfach. |
| Kompatibilität mit verschiedenen Lagerbedingungen | |
| Nitrocellulosemembranen haben eine geringere Festigkeit, um verschiedenen Lagerbedingungen standzuhalten. | Nylonmembranen reagieren robuster auf verschiedene Lagerbedingungen. |
| Verwenden | |
| Vorbenetzung ist erforderlich. | Für Nylonmembranen ist keine Vorbenetzung erforderlich. |
| Hydrophile Natur | |
| Nitrocellulosemembranen sind von Natur aus hydrophil, aber weniger hydrophil als Nylonmembranen. | Sie sind von Natur aus stark hydrophil. |
| Immobilisierungspotential | |
| Nitrocellulosemembranen haben eine geringere Affinität zu Nukleinsäuren. Aber es hat eine hohe Affinität zu Proteinen. | Nylonmembranen haben ein hohes Bindungspotential mit Nukleinsäuren als Nitrocellulosemembranen. |
Zusammenfassung - Nitrocellulose vs Nylonmembran
Nitrocellulose- und Nylonmembranen sind spezielle Folien, die in der Blotting-Technik verwendet werden, um das Bandenmuster auf dem Gel zu reproduzieren. Sie ermöglichen den Nachweis einer bestimmten Sequenz oder eines Proteins aus den Gemischen durch Immobilisierung auf der Membran. Sobald die Moleküle auf der Membran immobilisiert sind, können sie als Substrat für die Hybridisierungsanalyse mit markierten Sonden verwendet werden. Die Nitrocellulosemembran wird aufgrund ihrer hohen Bindungsaffinität mit Proteinen üblicherweise zum Proteinnachweis in der Western-Blot-Technik verwendet. Nylonmembranen werden häufig für das Southern- und Northern-Blotting verwendet. Dies ist der Unterschied zwischen Nitrocellulose und Nylonmembran.
